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有效分離多組分化合物,制備色譜技術(shù)獲廣泛應(yīng)用

來源:智匯工業(yè)

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關(guān)鍵詞:制備色譜

    制備色譜是指采用色譜技術(shù)制備純物質(zhì),即分離、收集一種或多種色譜純物質(zhì)。制備色譜中的“制備”這一概念是指獲得足夠量的單一化合物,以滿足研究和其他用途。制備色譜技術(shù)則是用于分離提取天然產(chǎn)物有效成分的一種重要技術(shù)。

      業(yè)內(nèi)人士表示,制備色譜技術(shù)的出現(xiàn)使色譜技術(shù)與經(jīng)濟(jì)利益建立了聯(lián)系,其已經(jīng)成為現(xiàn)代科學(xué)研究和生產(chǎn)實(shí)踐中分離多組分化合物的一個(gè)重要技術(shù)手段,尤其是在自然界中天然產(chǎn)物活性成分的提取和純化中起著重要作用。

      在制備色譜技術(shù)中,薄層色譜技術(shù)屬于液相色譜技術(shù)的范疇,經(jīng)典的制備型薄層色譜設(shè)備簡單,投資較少,但處理量較小,通常用來分離毫克級的樣品,且被分離的化合物需要從薄層板上刮下,并將其從吸附劑中提取出來。

      常壓柱色譜應(yīng)用較為廣泛,技術(shù)也相對成熟。主要包括吸附柱色譜、分配柱色譜、離子交換色譜、凝膠色譜、親和色譜、干柱色譜等。其中,吸附柱色譜中的硅膠吸附柱色譜是目前應(yīng)用較為廣泛的一種常壓柱色譜。

      加壓制備色譜技術(shù)是一種使用較為廣泛的色譜分離純化技術(shù),它是將分離填料填裝在色譜柱內(nèi),用液體流動(dòng)相進(jìn)行洗脫,利用藥物中不同活性成分與填料相互作用力的差異來分離混合物。

      高速逆流色譜是逆流色譜中最具實(shí)用意義的一類,高速逆流色譜分離柱的固定相無載體,消除了載體對分離過程的影響,適合分離極性物質(zhì)和具有生物活性的物質(zhì),且高速逆流色譜超載能力強(qiáng),進(jìn)樣量大,尤其適用于制備性分離,并同時(shí)具備高回收率。

      模擬移動(dòng)床色譜技術(shù)主要應(yīng)用于石油化學(xué)工業(yè),超臨界流體色譜則是對氣相色譜和高效液相色譜的補(bǔ)充,是根據(jù)待測物在固定相和流動(dòng)相兩相中的分配系數(shù)不同,繼而實(shí)現(xiàn)對待測物的先后洗脫。

      對于制備色譜技術(shù),很多用戶也有許多疑問。比如做柱層析時(shí)(國產(chǎn)大孔吸附樹脂),怎么才能把洗脫液中的樹脂殘留物處理干凈?

      專家認(rèn)為,大孔吸附樹脂在使用前,一般需要進(jìn)行處理,方法包括用色譜純的甲醇或乙睛洗到?jīng)]有吸收;或樹脂用乙醇浸泡2天,丙酮浸泡2天,然后用常規(guī)的酸、堿洗,再用丙酮回流兩小時(shí)。

      制備色譜柱該如何測柱效?業(yè)內(nèi)分析,可以選擇幾種物質(zhì),苯、甲苯、萘、蒽等的衍生物上柱,流動(dòng)相一般用65-80%的甲醇\水,測定猴根據(jù)保留時(shí)間計(jì)算塔板數(shù)。不過,由于制備色譜的管路死體積一般比較大,很難得到和供應(yīng)商相同的柱效,建議在制備住開始使用時(shí)在自己的色譜上測一下柱效,再定期檢測柱效進(jìn)行比較。

      反相色譜分離后,如何快速從流動(dòng)相中得到產(chǎn)品?可以考慮現(xiàn)在低溫下,減壓旋蒸出去其中的有機(jī)溶劑,然后用萃取的方法(如乙醇、氯仿萃取等)把產(chǎn)品萃取出來,然后再低溫再旋蒸,這樣就可以不將溫度升高而得到產(chǎn)品。

      如果要直接蒸掉流動(dòng)相,水泵的真空度要注意(檢查氣密性),否則蒸水會很慢。一般比較好的泵在60~70度即可蒸掉水,如果泵的真空度不好,可能需要80~90度才行,這樣容易暴沸,導(dǎo)致樣品損失,溫度太高也會引起物質(zhì)變性。

    (審核編輯: 林靜)

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